Estudo do mecanismo de ação de Omega- phonetoxina IIA da peçonha da aranha" Phoneutria nigriventer"

Abstract

Phoneutria nigriventer é uma aranha sul americana solitária e agressiva responsável pela maioria dos acidentes de araneísmo no Brasil. Através do fracionamento de uma fração do veneno da aranha armadeira em HPLC o peptídeo ro-phonitoxina IIA (co-Ptx IIA) foi isolado. Este peptídeo inibe correntes de cálcio ativadas por alta voltagem em neurônios. Com a finalidade de se definir a especificidade farmacológica, deste peptídeo, foram utilizadas técnicas de "patch clamp" em linhagens de células expressando canais de cálcio recombinantes Cav2.1, Cav2.2 e Cav2.3 (correntes P / Q - , N - , e R, respectivamente) e ensaios de interação com canais endógenos e expressos heterologamente. Correntes de cálcio geradas pelos canais Cav2.1 e Cav2.2 foram totalmente bloqueadas, de maneira praticamente irreversível, por 3 nM co-PtxIIA, enquanto as correntes Cav2.3 foram parcialmente inibidas, de maneira prontamente reversível. Os ensaios de interação com mono[1 2 5I]-co-PtxIIA indicam que as membranes expressando canais recombinantes Cav2.1 ou Cav2.2 apresentam uma única classe de sítios com afinidade similar (KD de aproximadamente 50 pM), enquanto a interação com Cav2.3 (KD na ordem de 67 nM) detectada foi de baixa afinidade.